процес на екстракция на силимарин
Силимарин, смес от флавонолигнани, проявяващи много фармакологични дейности, се получава от плодовете на бял трън (Silybum marianum L. Gaertner). Поради високото съдържание на липиди в плодовете от бодил, Европейската фармакопея препоръчва двуетапен процес на неговото извличане. Първо, плодовете се обезмасляват за 6 часа, като се използва н-хексан; второ, силимаринът се екстрахира с метанол за още 5 часа.
Представените данни показват, че този изключително дълъг традиционен процес на екстракция на Soxhlet може да бъде съкратен до няколко минути, като се използва течна екстракция под налягане (PLE). PLE също така позволява да се елиминира етапът на обезмасляване, изискван при традиционната процедура, като по този начин се опростява процедурата за извличане на силимарин и се предотвратява загубата на силимарин, причинена от обезмасляване. Възстановяванията на PLE, получени при оптимизирани условия на екстракция, са очевидно по-добри от тези, получени чрез препоръчаната от Фармакопеята процедура за екстракция на Soxhlet.
Добивът на PLE на силихристин, силидианин, силибин А, силибин В, изосилибин А и изосилибин В в ацетон е съответно 3,3, 6,9, 3,3, 5,1, 2,6 и 1,5 mg / g от обезмаслените плодове. 5-часовата екстракция на Soxhlet с метанол върху обезмаслени плодове дава само ~ 72% от количеството силимарин, получено за 10 минути PLE при 125 ° C.
Какво представлява Silybum?
Silybum marianum L. Gaertner, обикновено наричан катобял трън, благословен магарешки бодил, Мариански бодил, Мери трън или Свети Мери' s Thistle, е едногодишно или двугодишно растение от семейство Asteraceae. Растението, първоначално растящо в Южна Европа и Азия, сега се среща по целия свят (1). В момента този обезпокоителен плевел се отглежда като лечебно растение и е една от най-важните лечебни култури в Европа.
Млечният трън се използва за медицински цели повече от 2000 години, най-често за лечение на чернодробни заболявания (цироза и хепатит), както и за защита на черния дроб от токсични вещества (2–5). Неотдавнашен изследователски интерес към това растение беше стимулиран от проучвания, показващи изключително високата му противотуморна активност. Екстрактите от растението сега се подлагат на интензивно проучване за експериментална химиопрофилактика на рака и за подобряване на страничните ефекти от химиотерапията (6). Последните доклади демонстрират, че екстрактите от това растение се характеризират и с много други фармакологични дейности, като противовъзпалителни и антифибротични ефекти (2, 7, 8).
Силимарин, смес от флавонолигнани, проявяваща много фармакологични дейности, се получава от семената на бял трън (Silybum marianum L. Gaertner). Общите процедури, използвани досега за екстракция на силимарин, се основават главно на бавни високотемпературни методи за екстракция с разтворител. Недостатъците, свързани с тези техники, доведоха до търсенето на нови алтернативни процеси на екстракция, които допълнително биха могли да се подобрятекстракти от силимаринкачество. Последното е особено важно по отношение на приложението на силимарин. Получените екстракти от силимарин всъщност могат да съдържат токсични органични остатъци, които трябва да бъдат премахнати, за да се постигне приемливост от потребителите.
В опит да подобри процеса на извличане на силимарин и да го направи по-ефективен и екологичен, наскоро екстракция с разтворител с помощта на микровълнова печка, екстракция с разтворител с помощта на ултразвук, екстракция с течност под налягане, екстракция с помощта на ензими, екстракция на свръхкритична течност и особено извличане на вода с подкритично значение известни също като методи за извличане на гореща вода под налягане са разработени и приложени.
Материали и методи
Растителен материал
Сушени плодове от S. marianum L. Gaertner са закупени от местна аптека (Люблин, Полша) през есента на 2011 г. Достатъчно голяма представителна проба от растителния материал (около 500 g) се смила и пресява, за да се получи размер на частиците 0,4 mm. Прецизно претеглените части от материала са използвани за екстракции.
Материали и реактиви
Стандартизираният сух екстракт от S. marianum L. Gaertner и силибин В (с чистота 98%), прилагани като стандарти, е закупен от Sigma-Aldrich, Полша. Ацетонът, етилацетатът, фосфорната киселина, н-хексанът (всички те са със степен на аналитичен реагент) и метанолът (класът на аналитичния реагент и HPLC) са закупени от Полския химически завод (POCh, Гливице, Полша). Водата се пречиства, използвайки Milli-Q система от Millipore (Millipore, Bedford, MA, USA). Неутрално стъкло, получено като подарък от местни стъкларски заводи (фракция 0,4–0,6 mm), беше приложено като диспергиращ агент в клетката PLE.
Екстракция на течност под налягане
PLE се извършва с инструмент Dionex ASE200 (Dionex Corp., Сънивейл, Калифорния, САЩ). Растителният материал (0,5 g) се смесва с инертен материал (неутрално стъкло) и се поставя в екстракционна клетка от 22 ml от неръждаема стомана, съдържаща филтърна хартия на дъното. Друг кръг от филтърна хартия беше поставен в горната част на екстракционната клетка. Накрая клетката беше плътно затворена и поставена в нагревателната фурна.
Съдържанието на клетката се извлича при работно налягане от 60 бара. В края на процеса, извлечената проба се промива, използвайки обема на разтворителя, равен на 60% от обема на екстракционната клетка. И накрая, пробата се продухва в продължение на 60 s, като се прилага азот под налягане (150 psi.), И екстрактът се събира в 60-милилитров стъклен флакон с покрита с тефлон гумена капачка. Обемът на събрания екстракт е между 25 и 31 ml, в зависимост от плътността на опаковане на екстракционната клетка. Полученият екстракт се прехвърля в 50-милилитрова мерителна колба и се пълни до обема си, като се използва подходящ тип разтворител. Бяха извършени три независими екстракции при същите условия. Между циклите системата се промива с подходящ екстракционен разтворител.
Параметрите на PLE, които са изследвани, са тип разтворител (метанол, ацетон и етилацетат), температура (50, 75, 100, 125 и 150 ° C), време (5, 10, 15 и 20 минути) и брой екстракционни цикли (1 –5). За процеса на обезмасляване на PLE като разтворител се прилага н-хексан, а изследваните параметри са температура (50 и 100 ° C) и време (5 и 10 минути) на отстраняване на липидите. Екстрактите от ацетон и етилацетат се изпаряват до сухо под вакуум и се разтварят отново в метанол преди хроматографски анализ.
Екстракция на Сокслет
Изчерпателните екстракции в апарата Soxhlet бяха извършени, като се използваха порции от 2.0 g от материала. Прецизно претеглените проби бяха прехвърлени в хартиена пръчка. Натовареният напръстник се вкарва в 100-милилитровия екстрактор Soxhlet. Екстракциите се извършват в двустепенен процес (n=3). В първия етап от процедурата растителният материал се обезмаслява за 6 часа, като се използват 75 ml n-хексан. Във втория силимарин се екстрахира в продължение на 5 часа със 75 ml метанол. След охлаждане до стайна температура полученият екстракт се прехвърля в 100-милилитрова мерителна колба, която впоследствие се пълни до обема си с метанол. Бяха извършени три независими екстракции.
Хроматографски анализ на екстракти
HPLC измерванията бяха извършени на течен хроматограф Dionex (Dionex Corp.), състоящ се от хроматографска камера (LC20), съдържаща автоматизиран инжекционен клапан PEEK, оборудван с 10 μL контур за проба, градиентна помпа (GP50), детектор на абсорбция (AD25) и детектор с фотодиодна решетка (PDA100). Цялата хроматографска система беше под контрола на системата за събиране на данни PeakNet6. Хроматографското разделяне се извършва при 40 ° С, като се използва колона Prodigy ODS-2 (5 μm, 250 × 4.6 mm, ID) (Phenomenex, Torrance, CA, USA). Подвижната фаза А е смес от метанол с воден разтвор на фосфорна киселина, съдържаща 0,5 ml 75% фосфорна киселина в 100 ml разтвор (35: 65, v / v). Подвижната фаза В представлява смес от метанол с воден разтвор на фосфорна киселина, съдържаща 0,5 ml 75% фосфорна киселина в 100 ml разтвор (50: 50, v / v). Скоростта на потока е 0.8 mL / min. Анализите се извършват в подвижен фазов градиент с процентното съдържание на В в А, вариращо, както следва: начална концентрация, 0% В; 28 минути, 100% В; 35 минути, 100% В, 36 минути 0% В. Преди следващия анализ колоната се уравновесява с използване на подвижна фаза, съдържаща 0% В за 20 минути. Всеки екстракт се анализира HPLC три пъти. Дължината на вълната за откриване на флавонолигнани беше зададена на 288 nm, а UV-Vis спектрите от 210 до 500 nm също бяха записани за пикова характеристика.
Качественият анализ на екстрактите беше извършен чрез сравняване на времената на задържане на пиковете и техните UV-Vis спектри в екстрактите по отношение на тези на стандартизираната суха проба силимарин. За приготвянето на стандартизирания сух разтвор на силимарин, 0,02 g порция от пробата, съдържаща 5,0 mg силибин А + В, се разтваря в 50 ml метанол. Пиковете за силихристин, силидианин, силибин А, силибин В, изозилибин А и В се появяват при време на задържане съответно от 15,1, 17,4, 27,5, 29,1, 33,6 и 34,8 минути. Количественият анализ се основава на стандарт силибин В и се използва външен стандартен метод. Генерирана е калибрационна крива от пет концентрации на съединението в концентрационния диапазон от 0,1-1,0 mg / ml. Бяха извършени три измервания на пикова площ за всяка концентрация на стандартен разтвор. Характерните параметри на получената калибрационна крива бяха както следва: наклон, 0,516 и отсечка, 0,003. Установено е, че калибрационната крива е линейна в тествания диапазон на концентрация. Установено е, че коефициентът на корелация е> 0.995. Поради трудностите при закупуването на силихристин, силидианин, силибин А, изозилибин А и В, количествата на тези съединения бяха изчислени чрез свързване на техните хроматографски отговори с калибрационната крива за силибин В.
Статистически анализ
Всички данни са изразени като средно ± стандартно отклонение (SD). Дисперсионният анализ (ANOVA) и F-тест бяха използвани за оценка на влиянието на условията на PLE върху добива на силимарин. Средните стойности се считат за значително различни, когато резултатът от сравнените параметри се различава при P=0,05 на значимост. За да се провери значимостта на всеки коефициент на Фишер, бяха използвани Р-стойностите.
Резултати
Фигура 1а представя типична хроматограма на екстракт от PLE, получен от плодовете на S. marianum L. Gaertner, докато Фигура 1b показва хроматограмата на екстракция на силимарин от разтвор на бял трън, приготвен за разтваряне на стандартизирания сух екстракт от S. marianum L. Gaertner в метанол (1 mg / ml). Анализът на хроматограмите на PLE или Soxhlet екстракти с този за стандартизиран разтвор (времена на задържане, UV-Vis спектри и индекс на пикова чистота) доказа, че приложените хроматографски условия позволяват достатъчна разделителна способност на изследваните съединения, пикове, номерирани от 1 до 6 от примерни компоненти на матрицата. Пиковете бяха идентифицирани като: (1) силихристин, (2) силидианин, (3) силибин А, (4) силибин В, (5) изосилибин А и (6) изосилибин В, съответно.
Как да извлечете бял трън?
За разлика от повечето билки, семената от бял трън не се извличат много добре във вода, така че не се опитвайте да правите чаша чай от тях! Вместо това яжте пресните смлени семена или вземете капсула с добро качество. Ако използвате семената, купете ги цели и след това ги смилайте, ако е необходимо (аз използвам кафемелачка, за да ги направя на едър прах). Семената вкусват мазно, сладко и горчиво наведнъж - може би са придобит вкус, но изобщо не са неприятни. Започнете с приемане на 1/2 до 1 супена лъжица на ден поръсена върху вашата храна и вижте как ви се струва, като коригирате количеството според нуждите си.
Съставки
1 чаша хладка вода
1 чаша 100 доказателствен алкохол Използвам водка
¾ до 1 чаша семена от бял трън, ако е възможно, смлени
Инструкции
Стерилизирайте използвания буркан Mason, като го поставите във вряща вода за около 10 минути или като го поставите върху решетката във фурната при около 250 градуса за 15 минути.
Изсипете всички съставки в буркан Mason.
Поставете нов капак върху буркана и го завийте здраво с пръстен.
Разклатете буркана енергично за около 1 минута.
Поставете буркана на хладно тъмно място за пет седмици.
Разклащайте буркана всеки ден, за да сте сигурни, че семената от магарешки бодил не изплуват до върха и се вливат напълно с алкохол и вода.
В края на определения брой седмици прецедете магарешкия трън далеч от течността през фино мрежесто цедка - запазвайки течността. Ако нямате фино мрежесто цедка, използвайте малък гевгир и / или подредете гевгир с няколко филтъра за кафе, за да намалите размера на отворите.
Колко време, за да влезе в действие бял трън?
Семената от бял трън могат да предпазят чернодробните клетки от токсични химикали и лекарства. Изглежда, че има и понижаващи кръвната захар, антиоксидантни и противовъзпалителни ефекти.
Подобряване на параметрите на оксидативния стрес постоянно се отбелязва на шест месеца' продължителност на лечението със специализирана система за доставка на магарешки бодил (2). Подобряването на моделите на оксидативен стрес е отговорно за подобряване на инсулиновата сигнализация и функционирането на чернодробните клетки.
Колко дълго трябва да се приема бял трън? (ДОЗИРОВКА от бял трън)
Млечният трън се счита за безопасен в дози от 420 mg / ден перорално в разделени дози за период до 41 месеца. Един източник предлага дневни дози от 12 до 15 g сухи плодове за диспепсия и нарушения на жлъчната система, докато екстракт, съдържащ 200 до 400 mg / ден силимарин, се счита за ефективен при различни чернодробни заболявания.
Ползи от бял трън
1. Подпомага здравето на черния дроб
Една от най-честите употреби на бял трън е за лечение на чернодробни проблеми. Проучване от 2016 г. установи, че магарешкият бодил подобрява увреденото чернодробно увреждане при мишки. Необходими са повече доказателства, за да се докаже, че магарешкият бодил е от полза за черния дроб на човека по същия начин. Активната съставка в бял трън, силимарин, действа като антиоксидант, като намалява производството на свободни радикали. Учените смятат, че това създава детоксикиращ ефект, поради което именно магарешкият бодил може да бъде от полза при чернодробни проблеми.
Докато не се извършат повече изследвания, обаче, магарешкият бодил не се препоръчва като основна възможност за лечение на чернодробни проблеми. Но може да е полезно допълнително лечение, което да опитате.
2. Насърчава здравето на кожата
Маслото от бял трън може да се използва локално за подобряване на здравето на кожата.
Млечният бодил може да помогне за насърчаване на здравата кожа. Проучване от 2015 г. установи, че бял трън помага за подобряване на възпалителните състояния на кожата, когато се прилага върху кожата на мишки.
Установено е също, че бял трън има антиоксидантни и антиейдж ефекти върху човешките кожни клетки в лабораторна среда в друго проучване.
Необходими са допълнителни изследвания върху хората, за да се установят какви ползи може да очаква човек от прилагането на бял трън върху кожата си.
3. Намалява холестерола
Високият холестерол може да доведе до проблеми със здравето на сърцето и да увеличи шанса на човек за инсулт.
Проучване от 2006 г. предполага, че бял трън може да играе важна роля за поддържане на нивата на холестерола. Установено е, че нивата на холестерола са по-ниски при хората, приемащи бял трън за лечение на диабет, отколкото тези, приемащи плацебо.
4. Подпомага отслабването
Първоначалното изследване върху животни, проведено през 2016 г., установи, че силимаринът причинява загуба на тегло при мишки, хранени с диета, предназначена да предизвика увеличаване на теглото.
Това предполага, че бял трън може да бъде полезен за тези, които искат да отслабнат. За да се потвърди това обаче, са необходими повече изследвания на ефектите от бял трън върху загубата на тегло при хората.
5. Намалява инсулиновата резистентност
Изследване върху мишки установи, че екстрактът от бял трън помага за намаляване на инсулиновата резистентност. Инсулиновата резистентност е проблем за хората с диабет тип 2.
Въпреки че това изследване предполага, че магарешкият бодил може да играе роля в управлението на диабета, са необходими повече изследвания, за да се потвърди дали магарешкият бодил намалява инсулиновата резистентност и подкрепя управлението на диабета.
6. Подобрява симптомите на алергична астма
Активната съставка на бял трън може да помогне за намаляване на възпалението. Проучване от 2012 г. установи, че силимаринът помага да се предпази от възпаление в дихателните пътища на мишки с алергична астма.
Необходими са повече изследвания, за да се види дали силимаринът носи полза на симптомите на астма при хората.
7. Ограничава разпространението на рака
Млечният трън може да помогне за спиране на разпространението на някои видове рак. Преглед от 2016 г. установи, че екстрактът от бял трън инхибира растежа на раковите клетки при колоректалния рак.
Необходими са повече изследвания, за да се определи как магарешкият бодил може да се използва за борба с рака.
8. Подпомага здравето на костите
Чаят от бял трън може да помогне за предотвратяване на загуба на кост, причинена от липса на естроген. Млечният бодил може да играе съществена роля в поддържането на здравето на костите. Проучване от 2013 г. установи, че бял трън помага да се предотврати загубата на костна маса. Изследването разглежда конкретно загубата на кост, причинена от дефицит на естроген. Все още не е ясно дали бял трън е еднакво полезен за загуба на костна маса с различна причина. Необходими са допълнителни проучвания, преди да е сигурно да се заключи, че магарешкият бодил поддържа здравето на костите при хората.
9. Подобрява познанието
Проучване от 2015 г. установи, че бял трън повишава устойчивостта на оксидативен стрес. Оксидативният стрес е потенциална причина за болестта на Алцхаймер.
По този начин, бял трън може да помогне за подобряване на познанието и лечение на дегенеративни състояния, които засягат ума. Необходими са повече изследвания върху хората, за да се потвърдят ефектите от бял трън върху познанието.
10. Засилва имунната система
Млечният трън може да помогне за укрепване на имунния отговор на човек' и да му помогне да се пребори с инфекцията.
Проучване от 2016 г. върху животински модел установи, че екстрактът от бял трън подобрява имунитета при консумация. По-старо проучване установи, че екстрактът от бял трън има положителен ефект върху имунния отговор при хората.
Необходими са повече проучвания с човешки участници, преди учените да могат да кажат със сигурност, че бял трън повишава имунната система на човек.
Странични ефекти от бял трън
Изглежда, че магарешкият бодил има малко странични ефекти, дори когато се приема в продължение на няколко години. Някои хора имат гадене, диария, сърбеж и подуване на корема.
За насипен прах от бял трън, моля, свържете се с нас наherbext@undersun.com.cn
Референции: https: //academic.oup.com/chromsci/article/53/2/366/307144
https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/B9780128093801000152
https://www.cambridgenaturals.com/blog/milk-thistle-food-for-the-liver
https://www.survivalsullivan.com/milk-thistle-extract/
https://www.webmd.com/digestive-disorders/milk-thistle-benefits-and-side-effects
https://www.medicalnewstoday.com/articles/320362#how-to-use-milk-thistle